細胞培養(yǎng)所需的溫度取決于物種的體溫和分離培養(yǎng)細胞類型的微環(huán)境

　　細胞培養(yǎng)所需的溫度取決于物種的體溫和分離培養(yǎng)細胞類型的微環(huán)境。雖然大多數(shù)人類和哺乳動物細胞系在36–37°C下孵育，但源自冷血動物的細胞系可以在15°C至26°C之間的更寬溫度范圍內維持。大多數(shù)在實驗室培養(yǎng)的人類和哺乳動物細胞系的pH值應嚴格控制并保持在7.2–7.4的生理pH值。相反，一些成纖維細胞系有利于pH7.4和7.7之間稍微偏堿性的條件，而轉化細胞系更喜歡pH7.0和7.4之間的偏酸性環(huán)境。
　　通過嚴格調節(jié)和監(jiān)測細胞培養(yǎng)環(huán)境溫度的振蕩培養(yǎng)箱，可以實現(xiàn)細胞培養(yǎng)的恒定溫度。隨著細胞的繁殖，它們的生長需要在培養(yǎng)基中提供能量，例如以葡萄糖的形式。代謝時，其副產物包括丙酮酸、乳酸和CO2。大規(guī)模細胞培養(yǎng)時可以使用乳酸檢測儀進行乳酸含量檢測。由于pH值取決于CO2和HCO3-（碳酸氫鹽）的平衡，因此向細胞培養(yǎng)基中添加基于碳酸氫鹽的緩沖液也可以平衡CO2濃度。其他pH緩沖液可以是有機性質的，包括4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)(10–25mM)或3-(N-嗎啉代)丙磺酸(MOPS)(20mM)。
　　許多細胞培養(yǎng)基含有pH指示劑（例如，酚紅），顯示酸性（黃色）和堿性（粉紅色）條件之間的顏色范圍。此外，大氣中CO2濃度的波動也可以改變pH水平。因此，細胞應在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，該培養(yǎng)箱還允許將CO2張力調整至5–7%。為了延遲pH值的變化，可以用其他碳源（例如半乳糖或果糖）代替葡萄糖。雖然這會減慢細胞生長的速度，但也會減少乳酸等副產物的積累。對于在低氧張力（缺氧）下模擬病理或生理條件的特定細胞培養(yǎng)物，建議使用可調節(jié)的1–21%氧濃度與氮氣平衡的缺氧培養(yǎng)箱。蘇州阿爾法的葡萄糖乳酸分析儀、生物反應器、恒溫恒濕培養(yǎng)箱細胞培養(yǎng)搖瓶等廣泛用于細胞培養(yǎng)。