STR檢測服務來分析分析STR的原理

 　　STR檢測服務來分析分析STR的原理
　　短串聯(lián)重復序列（short tandem repeat, STR），也稱微衛(wèi)星 DNA（microsalite DNA） ，是由2 - 6個堿基對作為核心單位，串聯(lián)重復形成的一類DNA序列，由于核心單位重復數(shù)目在個體間呈高度變異性并且數(shù)量豐富，構成了STR基因座的遺傳多態(tài)性。它分布于人類整個基因組，平均每15 kb就存在一個STR基因座。人類基因組內(nèi)已發(fā)現(xiàn)了七千個以上的STR位點。它具有分布廣泛，易于檢測，信息量大，有高度多態(tài)性并遵循孟德爾共顯性遺傳等優(yōu)點。是繼限制性片段長度多態(tài)性 （RFLP） 之后的第二代遺傳記，目前STR分析已廣泛應用于遺傳制圖、連鎖性分析、法醫(yī)學鑒定、疾病基因定位、物種多態(tài)性和遺傳病的診斷等諸多領域。
　　微衛(wèi)星（STR）檢測服務流程
　　1. 客戶提供
　　A.如果提供基因組DNA：至少提供100 ng DNA樣品（針對每個多態(tài)性位點，需樣品3-5 ul，濃度為30 - 50 ng/ul）
　　B.如果提供PCR產(chǎn)物：產(chǎn)物要通過預實驗的電泳檢測，特異性要好
　　C.如果需要設計引物，請?zhí)峁┠康钠涡蛄谢蛘呶⑿l(wèi)星檢測位點，引物設計好后需要客戶確認。
　　D.除提供樣品類型，DNA濃度和純度值外，還需要注明可能殘留的抑制劑成分。樣品溶解在ddH2O中，如果不是，請注明溶解液成分。
　　2. 確定STR位點，設計實驗方案，包括熒光標記的選擇，引物的設計、合成和標記，熒光分子量內(nèi)標的選用等。
　　3. 按照所設計的實驗方案完成熒光PCR，利用瓊脂糖電泳檢測結果；若PCR產(chǎn)物特異性不夠，將進行優(yōu)化。
　　4. PCR產(chǎn)物通過ABI 3730XL 測序儀器進行毛細管電泳檢測，獲得擴增片段大小的數(shù)據(jù)
　　5. 用GeneScan 3.0/GenoTyper 2.0或GeneMapper 3.2等軟件對收集到的數(shù)據(jù)進行處理分析，將產(chǎn)物片段大小、數(shù)量多少的信息轉(zhuǎn)化成直觀準確的波形圖譜，為下一步進行關聯(lián)分析或連鎖分析等遺傳分析提供可靠的數(shù)據(jù)。
　　6.發(fā)送準確的微衛(wèi)星（STR）分型結果報告及PCR產(chǎn)物。